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LBT - Lebensmittel und Biotechnologie • Thema anzeigen - Taqman - Real time PCR
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 Betreff des Beitrags: Taqman - Real time PCR
 Beitrag Verfasst: 20.06.2012, 07:20 
Versuchskaninchen
Versuchskaninchen

Registriert: 17.11.2010, 17:29
Beiträge: 28
eine Sache hab ich hier nicht verstanden -
also ich hab meine sonde die an einem ende meinen reporter und am anderen meinen quencher hat und bei jeder replikation wird die sonde die an der ssdna "klebt" verdrängt, q und r entfernen sich voneinander und fluoreszenz von r kann gemessen werden.. jetzt aber -
kann diese sonde neu binden? wird sie auch repliziert oder gibt es einfach so viele sonden insgesamt (überschuss) dass an jede neu entsthende ssdna gleich eine sonde bindet?

vielleicht weiß das ja jemand
danke im voraus


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 Betreff des Beitrags: Re: Taqman - Real time PCR
 Beitrag Verfasst: 20.06.2012, 08:15 
Versuchskaninchen
Versuchskaninchen

Registriert: 03.11.2011, 19:26
Beiträge: 66
Die Sonden werden ja durch Exonukleaseaktivität abgebaut und zerschnitten -> zerstört.
Neu binden können sie deswegen sicher nicht.
Interessant wäre aber was mit den Reporter passiert - denn die fluoreszieren ja dann und so würde ja bei jedem Zyklus die Fluoreszenz steigen. Ok vl wäre dass aber auch nicht weiters schlimm - kann man ja sozusagen als Blank-Wert abziehen.
Vielleicht wird der Reporter aber auch im Zuge einer Erhitzung etc. zerstört?!
Weis das vl jemand?


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