Hallo!
Hab schon wieder mal ne Frage.
Bin grad bei der Proteinreinigung und da gibts eine Folie wo man die Proteinkonzentration bestimmen soll. Wär super wenn mir jemand erklären würd, wie das geht.

Angabe:
Die 1:50 Verdünnung deiner Probe ergibt eine A=0,65. Berechne die Proteinkonzentration deiner Probe.

Geh ich da übers Lambert-Beer'sche Gesetz: A=ε*c*d

Ich hoff ihr könnt mir helfen.
Danke.

Na, einfach in die Formel einsetzen und c ausrechnen! Das A hast du ja schon, d ist so gut wie immer 1 (cm) und das epsilon (Extinktionskoeffizient) sollte gegeben sein. Dann hast du die Konzentration c in mol/L. Und dann noch mit 50 multiplizieren, da du ja von einer 1:50 Verdünnung ausgehst.

Oder hast du bei dem Bsp eine Geradengleichung angegeben? Dann setzt du für y die Extinktion ein und x ist die gesuchte Konz (wieder mit 50 multiplizieren).

Ah ok. Epsilon war nicht gegeben, aber dafür eine Geradengleichung.
Danke für die Erklärung.

Hätt da noch ne Frage zur Dialyse, Ultrafiltration und Gefriertrocknung ob ich das eh richtig verstanden hab.
Bei der Dialyse hab ich ja dann als Ergebnis die Lösung im Schlauch.
Bei der der Ultrafiltration hab ich alle meine Proteine auf der Membran? Die ist aber nicht trocken, oder.
Und bei der Gefriertrocknung hab ich dann nur mehr meine "trockenen" Proteinkristalle.
Stimmt das so eh.

@Lactobacillus: Tausend Dank für die super Antworten.

Bei der Dialyse füllst du den Schlauch mit deiner Proteinlösung und legst diesen dann in den Puffer --> Salz wandert raus, Protein kann nicht durch und bleibt also drinnen. --> Konz. von Salz nimmt ab

Bei Ultrafiltration hätte ich gesagt, dass man das Volumen nur verringert, weil auf der Folie steht ja "Volumen nimmt ab", sprich weniger Volumen mit höherer Proteinkonz.,aber gleiche Konz. an Salz wie vor Filtration (Menge von Salz nimmt aber trotzdem ab, da ein gewisser Teil ja ins Filtrat mitgewandert ist!)
Verständlich?

Bei Gefriertrocknung hast du dann deine Proteine und das Salz.

Lg

Aber bei der Ultrafiltration ist ne Skizze mit Retentat (enthält Proteine), einer Ultrafiltrationsmembran und einem Filtrat (proteinfrei).
Daher hab ich angenommen, dass ich mir die Proteine aus der Lösung mittels Filter raushol.